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流式染色数据处理(流式染色注意事项)

时间:2024-08-04

flowjo分析流式数据怎么除掉死细胞

1、死细胞一般要通过染料染色,比如PI阳性的细胞,来排除。如果没有事先染色,只是通过FSC-SSC来看,会很不准。

流式FSC检测细胞大小,如何分析数据?

流式细胞只能比较细胞的相对大小和胞内的复杂程度,FSC对应的是细胞的相对大小,FSC的值越大表示细胞越大,SSC对应的是细胞内部复杂程度,SSC的值越大说明细胞内部的颗粒越多。

首先,使用Image J打开需要分析的图片;选择straight直线工具,对照标尺画一条直线。选择“analyse”→“measure”对上一步和标尺相同长度直线进行测量。根据标尺测量长度,设置试剂长度;“Analyse”→“set scale”。此处设置的图片标尺是50,单位μm. 设置完毕后,保存该设置。

一般FSC是用来看细胞大小的,而且在检测的时候是设为线性的。也就是说,FSC上的信号强弱是和细胞大小成正比的。前提是每次检测的时候机器的设置一样,并且gate out了碎片。

流式图数轴上FSC值和SsC值以“一般数序形式”表示,而荧光通道值常以“对数形式”(logarithmic scale)表示 流式直方图的x轴表示一个通道的值,y轴表示细胞数量。

流式细胞仪分析技术及应用

1、CD11B:单核细胞,巨噬细胞,中性粒细胞,NK细胞等;CD11C:树突细胞,单核细胞,巨噬细胞,中性粒细胞。流式细胞术是利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析及分选的技术。其测量速度快,最快可在1秒钟内检测上万个细胞。

2、流式细胞仪检测项目主要包括细胞表面标记分析、细胞内标记分析、细胞功能分析、细胞凋亡分析等。流式细胞仪是一种在液流中快速检测细胞特性的技术。它将单个细胞与特异性抗体结合,通过激光激发荧光,测量每个细胞的多个参数,从而实现对细胞的快速、多参数分析。

3、流式细胞技术是当代最先进的细胞定量分析技术之一。该技术依托 流式细胞仪 。其主要部件为光源、流动室、荧光检测部件、分选器。(1)光源。通常是激光光源,目的是提供足够的荧光激光能量。(2)流动室。其为流式细胞仪中最重要的部分。目的是使细胞流稳定流动,依次通过固定的检测区。

4、流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

5、细胞分选:根据需要,可以将不同类型的细胞进行分选,常用的分选方式有电荷静电分选、压缩空气分选、磁珠分选等。分选后的细胞可以用于进一步的实验或应用。总之,流式细胞术的基本原理是将细胞标记成不同类型并通过流式细胞仪进行多参数分析和排序。